WISH (人羊膜細(xì)胞) (Hela污染細(xì)胞系)

商品屬性

商品介紹

別稱(chēng) Wistar Institute, Susan Hayflick

年齡（性別） 女

組織來(lái)源 起源HeLa細(xì)胞污染

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

參考資料(來(lái)源文獻(xiàn))

生物安全等級(jí) 2

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 MEM＋1mM Sodium Pyruvate＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

抗原表達(dá)情況 The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.

基因表達(dá)情況 The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. The cells and tumors formed from the cells are positive for Dopa decarboxylase and are negative for the TAG-72 antigen.

細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠酶1(PON1)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： PON1 ELISA Kit

Porcine epinephrine (EPI) ELISA Kit 豬(EPI)檢測(cè)試劑盒

馬特定基因序列(Hor)核酸檢測(cè)試劑盒 48T

CLIAKitforLTC4(HumanLeukoieneC4)ELISAKit人白三烯C4

體液總?cè)樗岜壬ǘ繖z測(cè)試劑盒20次

ELISAKitGFAP雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白

IL21重組狗 IL21 / Interleukin 21 蛋白 Protein

Oct-4 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白(多肽 0.5mgOct-4 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白(多肽)

GLA重組人 alpha-Galactosidase A / GLA 蛋白 Protein

CD33 Protein Human 重組人 CD33 / Siglec-3 蛋白

TGFB1 Protein Mouse 重組小鼠 Latent TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白

Oct-4 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白(多肽 0.5mgOct-4 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白(多肽)

CD33 Protein Human 重組人 CD33 / Siglec-3 蛋白

IL21重組狗 IL21 / Interleukin 21 蛋白 Protein

TGFB1 Protein Mouse 重組小鼠 Latent TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白

GLA重組人 alpha-Galactosidase A / GLA 蛋白 Protein

WISH (人羊膜細(xì)胞) (Hela污染細(xì)胞系)小鼠血栓素A2(TXA2)檢測(cè)試劑盒 96T/48T

Human lupus aicoagula aibodies (LAC/LA) ELISA Kit 人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)檢測(cè)試劑盒

Humanα-galactoyl,GalELISAKit 人α半乳糖基抗體(Gal)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor(IL-2sR)ELISAKit大鼠白介素2可溶性受體

熒光標(biāo)記法組織端粒酶活性AP電泳分析試劑盒10次

MouseIerleukin2,IL-2ELISAKit小鼠白介素2(IL-2)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠幽門(mén)螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀(guān)察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。